ライフサイエンス 2019.06.25

培養細胞から組織標本、モデル生物まで―蛍光ボケを徹底排除してハイスループットに超高精細蛍光イメージング

蛍光顕微鏡

【サンプル】ケンミジンコ／核（緑）、チューブリン（赤）、セロトニン（シアン）【使用機器】THUNDER 組織標本、対物レンズ； HC PL FLUOTAR 40x / 1.30 OIL　【データ】332 µm x 332 µm x 84 µm、z=305 スタック　
【サンプル提供】Thomas Frase氏（生物学者）／ロストック大学、ドイツ

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蛍光顕微鏡のための「超」高精細蛍光イメージング技術がすごい

蛍光顕微鏡で画像を取得する際に発生してしまう、光の「ボケ」を徹底的に取り除き、驚くほどシャープでクリアな画像を得ることができる最新鋭のイメージングシステムが登場しました。素早く、簡単に、アーティファクトが無い超高精細な蛍光画像を取得したい方に最適です。

蛍光顕微鏡イメージングが劇的に向上する！デジタルイメージャー THUNDER

簡単…これまでの蛍光画像取得＋１クリックで超高精細な画像取得が可能です。
高速…蛍光画像の取得に合わせて高精細画像をリアルタイム表示します。
高コントラスト…低光量、短時間露光でも高輝度の画像を取得します。
低ダメージ…たった１枚の蛍光画像から高精細画像を生成するから褪色のリスクが最小限。

サンプルサイズにより最適化された THUNDER 顕微鏡の種類

リアルタイムに画像から蛍光ボケを取り除く最新技術

THUNDERはコンピュテーショナル・クリアリングシステムとデコンボリューションからなります。コンピュテーショナル・クリアリングシステムはLeica独自のアルゴリズムにより、顕微鏡が検出したすべての情報の中から重要なシグナルと不要な蛍光ボケを瞬時に分離・除去する技術です。複雑な挙動を示す生体サンプルの蛍光ボケさえも、リアルタイムに分離・除去することが可能です。

スフェロイド超高精細蛍光顕微鏡 — ［左：蛍光顕微鏡画像／右：THUNDER 画像］

従来の蛍光顕微鏡画像には焦点面から得られるシグナルだけでなく、焦点外から漏れこむ蛍光ボケが含まれており、高精細なものではありませんでした。蛍光ボケを取り除き高精細画像を取得するためには、デコンボリューションなどのソフトウェア処理、または、ハードウェアによるボケの除去が行われます。しかし、ソフトウェア処理を行う場合は、アーティファクトが出やすい、また処理に時間がかかるなどの問題が、そしてハードウェアを用いる場合には、１枚の高精細画像を取得するために複数回の撮影を行う必要があり、画像取得および処理に時間がかかる、光ダメージが起きやすいなどの問題がありました。一方、コンピュテーショナル・クリアリングシステムにより蛍光ボケを正確に「分離・除去」できる THUNDER は、デコンボリューション由来のアーティファクトが出にくいのが特徴です。また、高精細画像取得でよく用いられる共焦点顕微鏡や、構造化照明顕微鏡、ニポウディスク顕微鏡、ライトシート顕微鏡といったハードウェアを用いる場合に問題となる、モーションアーティファクトや光ダメージ、さらにサンプルの厚さに制限があるといった制約を受けることもありません。

超高精細蛍光顕微鏡観察 — ［左：蛍光顕微鏡画像／中央：THUNDER画像／右：蛍光ボケ画像］

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蛍光イメージングが劇的に変わる！ THUNDER 画像集

THUNDER は、培養細胞から組織標本、モデル生物まで、幅広いサンプルに対応しています。あなたのサンプルに最適な THUNDER システムは？不明点・ご質問は、いつでもお気軽にお問い合わせください。

ショウジョウバエ幼虫切片超高精細蛍光顕微鏡観察 — Drosophila third instar larval fillet labeled with AlexaFluor™647 for post-synaptic sites, AlexaFluor™555 conjugated to phalloidin, and AlexaFluor™488 labeling a subset of motor neurons. Sample courtesy Dr. Amicia Elliott, NIH/NIMH, Bethesda, MD (USA).

細胞膜受容体スフェロイド超高精細蛍光顕微鏡観察 — MIN6 cells grown as pseudoislets (pancreatic beta cells). DAPI (blue), Insulin (Alexa488, green), membrane receptor (Alexa594, red), phalloidin (Alexa647, white). Sample courtesy Dr. Rémy Bonnavion, MPI for Heart and Lung Research, Bad Nauheim (Germany).

皮質ニューロン超高精細蛍光観察 — Cultured Cortical Neurons. Green, beta-III-tubulin; blue, Nuclei. Image stack of 59 planes for a volume of 21 µm. Sample Courtesy: FAN GmbH, Magdeburg (Germany).

モデル生物オルガノイド超高精細蛍光顕微鏡観察 — An organoid approximately 150 µm in diameter mounted onto a depression slide.

マウスエンブリオ超高精細蛍光顕微鏡観察 — In this E12-14 mouse (wt sample), neurofilaments are stained in red to assess neuronal outgrowth. The mouse was cleared with the ScaleS reagent. Sample courtesy Yves Lutz, Centre d’imagerie, IGBMC (France).

いなご結節腫超高精細蛍光顕微鏡観察 — Image of a locust ganglion, showing a maximum projection. Sample thickness: 110µm, data volume: 376 MB.

マウス脳切片超高精細蛍光顕微鏡観察 — YFP mouse brain slices stained with GFAP-A647. Imaged with a THUNDER Imager Tissue. Courtesy Dr. Hong Xu, University of Pennsylvania, Philadelphia (USA).

皮質ニューロン超高精細蛍光顕微鏡観察 — Cultured cortical neurons. Red: anti-GFAP-Alexa568 (astrocytes); cyan: DAPI (nuclei); purple: anti-betaIII-tubulin-Alexa488 (mature cortical neurons). Z-stack of 59 planes (thickness: 21μm). Sample courtesy FAN GmbH.

マウス肝臓切片超高精細蛍光顕微鏡観察 — Mouse kidney section with Alexa Fluor™ 488 WGA, Alexa Fluor™ 568 Phalloidin, and DAPI. Sample: FluoCells™ Prepared Slide #3, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA USA.

ゼブラフィッシュ　幼生超高精細蛍光顕微鏡観察 — Zebrafish larvae (72 hours post fertilization). The blood vessels are indicated with green (fluorescence). Sample courtesy of Dr. Almary Guerra and Dr. Didier Stainier, Max Planck Institute for Heart and Lung Research, Bad Nauheim, Germany.

マウス腎臓切片超高精細蛍光顕微鏡観察 — Mouse kidney section with Alexa Fluor™ 488 WGA, Alexa Fluor™ 568 Phalloidin, and DAPI. Sample: FluoCells™ Prepared Slide #3, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA USA.

染色した培養ベロ細胞超高精細蛍光顕微鏡観察 — Cultured VERO cells stained with STAR488 Vimentin (green), STAR580 Tom20 (yellow), and DAPI (blue). Sample courtesy of Abberior GmbH, Göttingen, Germany.

血管周囲の平滑筋超高精細蛍光顕微鏡観察 — Smooth muscle around blood vessels in a 300 µm section of mouse lung. 1x objective. Courtesy of Dr. Mario Boehm, University of Giessen, Germany.

ゼブラフィッシュの心臓 — Zebrafish heart, DAPI (nuclei, blue), Tropomyosin (cardiomyocytes, red) and GFP (primordial cardiac layer, green). Courtesy of Anna Jazwinska, University of Fribourg, France.

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蛍光顕微鏡向けデジタルイメージャー
THUNDER

蛍光顕微鏡で画像を取得する際に発生してしまう、蛍光「ボケ」を徹底的に取り除き、驚くほどシャープでクリアな画像を得ることができる最新鋭のイメージングシステムTHUNDER。複雑な挙動を示す生体サンプルの蛍光ボケさえも、リアルタイムに分離・除去します。培養細胞からモデル生物まで、幅広いサンプルを「超」高精細に観察することができ、これまでのソフトウェアやハードウェアよりもアーティファクトの無い画像を素早く、簡単に取得できるのが特徴です。

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